CCK-8試劑盒應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解。可以用于大批量樣品的檢測。 實驗要點:
1.建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入CCK-8試劑后的培養時間。
2.有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時,建議斜貼著培養板壁加,不要插到培養基頁面下加,容易產生氣泡,會干擾OD值讀數。
3.白細胞可能需要培養較長時間。
4.當使用標準96孔板時,貼壁細胞的小接種量至少為1,000個/孔(100μL培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此*接種量不低于2,500個/孔(100μL培養基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗,請先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養基總體積的10%加入CCK-8溶液。
5.如果沒有450nm的濾光片,可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片,但是450nm濾光片的檢測靈敏度。
6.如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK-8之前更換新鮮培養基,去掉藥物的影響。當然藥物影響比較小的情況可以不更換培養基,直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。